Ricerca

Embrioni

Leggi dettagli

Negli ultimi decenni sono state sviluppate tecniche di riproduzione assistita e queste sono state impiegate soprattutto in animali da reddito, quali bovino, cavallo, suino e piccoli ruminanti.
La ricerca e attività commerciale svolta presso LRBA comprende in particolare la raccolta di oociti ed embrioni in vivo, maturazione di oociti in vitro, fertilizzazione in vitro (IVF) o fertilizzazione assistita (iniezione intracitoplasmatica dello spermatozoo, ICSI), coltura embrionale in vitro. Inoltre presso la nostra struttura sono stati sviluppati protocolli per la crioconservazione di gameti ed embrioni (congelamento tradizione e vitrificazione in paillettes o dispositivi quali cryoloop).
Oociti ed embrioni sono stati inoltre impiegati per lo sviluppo di test tossicologici di farmaci e sostanze chimiche.

PUBBLICAZIONI SELEZIONATE:
1. Merlo B, Del Prete C, Mari G, Iacono E. Overnight holding aids in selection of developmentally competent equine oocytes. Anim Reprod Sci. 2022 Oct;245:107071. doi: 10.1016/j.anireprosci.2022.107071. Epub 2022 Sep 17.
2.Del Prete, Chiara; Calabria, Alfonso; Longobardi, Valentina; Palumbo, Veronica; Merlo, Barbara; Iacono, Eleonora.; Tafuri, Simona; Carotenuto, Domenico; Ciani, Francesca; Damiano, Sara; Ciarcia, Robertoa; Cocchia, Natascia. Effect of Aqueous Extract of Maca Addition to an Extender for Chilled Canine Semen. Animals 2022; 12(13); Article number 1638.
3. Gonzalez-Plaza, Alejandroa; Brullo, Cristiano; Cambra, Josep M.; Garcia, Manuela; Iacono, Eleonora; Parrilla, Inmaculada; Gil, Maria Antonia; Martinez, Emilio A.; Martinez, Cristina A.; Cuello, Cristina. Equilibration time with cryoprotectants, but not melatonin supplementation during in vitro maturation, affects viability and metaphase plate morphology of vitrified porcine mature oocytes. Reprod Domest Anim 2022. Online ahead of print.
4. Dell’Eva G, Bolognini D, Iacono E, Merlo B. Superovulation protocols for dairy cows bred with SexedULTRA™ sex-sorted semen. Reprod Domest Anim 2019; 54(5):756-761.
5. Merlo B, Mari G, Iacono E. In vitro developmental competence of horse embryos derived from oocytes with a different corona radiata cumulus-oocyte morphology. Anim Reprod Sci 2018; 198: 233-237
6. Merlo B, Iacono E, Bucci D, Spinaci M, Galeati G, Mari G. Beta-mercaptoethanol supplementation of in vitro maturation medium does not influence nuclear and cytoplasmic maturation of equine oocytes. Reprod Dom Anim 2019; 51: 992-996.
7. Iacono E, Merlo B, Rizzato G, Mislei B, Govoni N, Tamanini C, Mari G. Effects of repeated transvaginal ultrasound-guided aspirations performed in anestrous and cyclic mares on P4 and E2 plasma levels and luteal function. Theriogenology 2014;82(2):225-231.
8. Zaniboni A, Merlo B, Zannoni A, Bernardini C, Lavitrano M, Forni M, Mari G, Bacci ML. Expression of fluorescent reporter protein in equine embryos produced through intracytoplasmic sperm injection mediated gene transfer (ICSI-MGT). Anim Reprod Sci 2013;137(1-2):53-61.
9. Merlo B, Iacono E, Regazzini M, Zambelli D. Cat blastocysts produced in vitro from oocytes vitrified using the cryoloop technique and cryopreserved electroejaculated semen. Theriogenology. 2008;70(1):126-130.

ABSTRACT SELEZIONATI
1.B.Merlo; R.Marcoccia; G.Mari; E.Iacono. Overnight holding of equine oocytes enhance cleavage and embryo compaction after ICSI. Journal of Equine Veterinary Science 2020; 89: 103057.
2. Gorlani C, Merlo B, Iacono E. Effects of myo-inositol on oocyte in-vitro maturation and subsequent embryo development in cows. Proceedings of first ECAR College Congress, 2019, Vienna
3. Merlo B, Mari G, Iacono E. In vitro developmental competence of horse oocytes with different cumulus morphology. Proceedings of 72nd meeting of Italian Society of Veterinary Sciences 2018: 205.
4. Boccia L, Iacono E, Rossi B, Merlo B. Effetcs of hot season on bovine oocyte quality: how to byopass the poor oocytes quality during his season. Reprod Fertil Dev 2015; 27: 229.
5. Merlo B, Mislei B, Bulfone G, Rizzato G, Iacono E, Mari G. Vitrification of equine expanded blastocysts. Proceedings of 11th Congress of Italian Society of Animal Reproduction (S.I.R.A.), Giugno 2013: 102-105.
6. Merlo B, Iacono E, Mari G. In vitro survival and viability of bovine morulae after vitrification in cryoloop. Proceedings of the 2nd Cost Action FA0702, Gemini General Conference Maternal Interactions with gametes and Embryos, October 2009: 75 (Abstract).

Medicina Rigenerativa

Dal 2006 sono in atto progetti su isolamento, espansione, caratterizzazione e crioconservazione di cellule staminali mesenchimali (MSCs) da tessuti adulti (tessuto adiposo, midollo osseo e sangue periferico) e fetali (liquido amniotico, sangue cordonale, gelatina di Wharton e membrana amniotica), in diverse specie animali (cavallo, bovino, suino, cane e gatto). Tutti i progetti sono volti allo sviluppo di protocolli di produzione di cellule utilizzabili per la terapia rigenerativa.
La caratterizzazione delle cellule isolate implica la determinazione della presenza di markers di staminalità mediante citofluorimetria, immunocitochimica, real time PCR, e differenziazione in vitro nelle linee mesodermiche (osso, cartilagine, tessuto adiposo). Sono in atto studi di determinazione dell’espressione genica di citochine pro e anti infiammatorie, studi di morfologici al fine di verificare la secrezione di microvescicole utilizzabili in terapia rigenerativa. Sono inoltre in atto studi sul metabolismo delle cellule staminali isolate da tessuti adulti e fetali per valutarne la capacità respiratoria e cause di invecchiamento cellulare precoce.

PROGETTI FINANZIATI:

- "CELLULE STAMINALI MESENCHIMALI PER LA TERAPIA RIGENERATIVA CUTANEA: L’IMPORTANZA DELLA MEDICINA VETERINARIA", Fondazione Cassa di Risparmio di Imola.
- POR FESR 2014-2020. Azione 1.2.2. Biomateriali multifunzionali per l’autoriparazione di tessuti e organi.
- PRIN 2009 Induzione e determinazione della pluripotenza di cellule embrionali, fetali e somatiche-mediante transfezione di geni pluripotenti (iPSCs)- nel bovino e nel cavallo.
- COFIN 2005 Isolamento e caratterizzazione di cellule staminali mesenchimali equine da midollo osseo e tessuto adiposo; potenziale impiego in un modello di lesione tendinea.
- PRRIITT 2004 Cellule staminali per riparazione tissutale: sviluppo di prodotti e protocolli per laboratori di ricerca.

PUBBLICAZIONI SELEZIONATE:
1. Merlo, Barbara; Baldassarro, Vito Antonio; Flagelli, Alessandra; Marcoccia, Romina; Giraldi, Valentina; Focarete, Maria Letizia; Giacomini, Daria; Iacono, Eleonora. Peptide Mediated Adhesion to Beta-Lactam Ring of Equine Mesenchymal Stem Cells: A Pilot Study. Animals 2022; 12(6); 734.
2. Colombo, Ilaria; Mislei, Beatrice; Mari, Gaetano; Iacono, Eleonora; Merlo, Barbara. Effect of platelet lysate on uterine response of mares susceptible to persistent mating-induced endometritis. Theriogenology 2022; 179: 204-210.
3. Iacono, Eleonora; Marcoccia, Romina; Merlo, Barbara. Current status on canine foetal fluid and adnexa derived mesenchymal stem cells. Animals 2021; 11(8): 2254
4. Marcoccia, Romina; Nesci, Salvatore; Merlo, Barbara; Ballotta, Giulia; Algieri, Cristina; Pagliarani, Alessandra; Iacono, Eleonora. Biological characteristics and metabolic profile of canine mesenchymal stem cells isolated from adipose tissue and umbilical cord matrix. Plos One; 16(3): e0247567.
5. Lanci A, Merlo B, Mariella J, Castagnetti C, Iacono E. Heterologous Wharton’s Jelly Derived Mesenchymal Stem Cells Application on a Large Chronic Skin Wound in a 6-Month-Old Filly. Frontiers Vet Sci 2019;6: Art 9.
6. Iacono E, Pascucci L, Bazzucchi C, Cunto M, Ricci F, Rossi B, Merlo B. Could hypoxia influence basic biological properties and ultrastructural features of adult canine mesenchymal stem /stromal cells? Vet Res Comm 2019; 42: 297-308.
7. Merlo B, Teti G, Mazzotti E, Ingrà, L, Salvatore V, Buzzi M, Cerqueni G, Dicarlo M, Lanci A, Castagnetti C, Iacono E. Wharton’s Jelly Derived Mesenchymal Stem Cells: Comparing Human and Horse. Stem Cell Rev Rep 2019; 14: 574-584.
8. Iacono E, Pascucci L, Rossi B, Bazzucchi C, Lanci A, Ceccoli M, Merlo B. Ultrastructural characteristics and immune profile of equine MSCs from fetal adnexa. Reproduction 2019; 154: 509-519.
9. Iacono E, Lanci A, Merlo B, Ricci F, Pirrone A, Antonelli C, Mariella J, Castagnetti C. Effects of Amniotic Fluid Mesenchymal Stem Cells in carboxymethyl cellulose gel on spontaneous pressure sores healing: clinical outcome in seven hospitalized neonatal foals. Turk J Biol 2016; 40: 484-492. doi:10.3906/biy-1507-147.
10. Iacono E, Rossi B, Merlo B. Stem cells from foetal adnexa and fluid in domestic animals: an update on their features and clinical application. Reprod Domest Anim 2015;50:353-364. doi: 10.1111/rda.12499.
11. Iacono E, Merlo B, Romagnoli N, Rossi B, Ricci F, Spadari A. Equine Bone Marrow and Adipose Tissue Mesenchymal Stem Cells: Cytofluorimetric Characterization, In Vitro Differentiation, and Clinical Application. J Eq Vet Sci 2015; 35:130-140.
12. Rossi B, Merlo B, Colleoni S, Iacono E, Tazzari PL, Ricci F, Lazzari G, Galli C. Isolation and in vitro characterization of bovine amniotic fluid derived stem cells at different trimesters of pregnancy. Stem Cell Rev. 2014 Oct;10(5):712-24.
13. Iacono E, Merlo B, Pirrone A, Antonelli C, Brunori L, Romagnoli N, Castagnetti C. Effects of mesenchymal stem cells isolated from amniotic fluid and platelet-rich plasma gel on severe decubitus ulcers in a septic neonatal foal. Res Vet Sci 2012;93(3):1439-40.
14. Iacono E, Cunto M, Zambelli D, Ricci F, Tazzari PL, Merlo B. Could fetal fluid and membranes be an alternative source for mesenchymal stem cells (MSCs) in the feline species? A preliminary study. Vet Res Commun 2012;36(2):107-118.
15. Iacono E, Brunori L, Pirrone A, Pagliaro PP, Ricci F, Tazzari PL, Merlo B. Isolation, characterization and differentiation of mesenchymal stem cells from amniotic fluid, umbilical cord blood and Wharton's jelly in the horse. Reproduction 2012;143(4):455-468.

POR FESR 2014-2020: Mat2rep